用PCR-RFLP技术鉴别嗜人按蚊和中华按蚊的研究

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目的依据嗜人按蚊和中华按蚊rDNA的ITS2区段基因特征,建立一种新的嗜人按蚊和中华按蚊基因鉴别技术.方法对不同地区的嗜人按蚊、可疑嗜人按蚊和中华按蚊样本通过采用特异性ITS2引物PCR扩增,限制性内切酶Rsa I和HinfI消化,以及琼脂糖凝胶电泳分析进行PCR-RFLP基因鉴别.结果不同地区嗜人按蚊rDNA的ITS2基因PCR扩增产物能被限制性内切酶Hinf I酶切,并显示一条450bp的酶切DNA条带;中华按蚊的ITS2基因PCR扩增产物则能被限制性内切酶Rsa I酶切,并显示400bp和200bp两条酶切DNA条带;辽宁可疑嗜人按蚊的PCR-RFLP结果与嗜人按蚊相同而广东珠海可疑嗜人按蚊的PCR-RFLP结果与中华按蚊相同.结论依据rDNA的ITS2区段基因特征建立的PCR-RFLP技术可用于嗜人按蚊和中华按蚊的基因鉴别.采用该PCR-RFLP基因鉴别技术发现辽宁可疑嗜人按蚊的基因与中国大陆的嗜人按蚊属同种,而广东可疑嗜人按蚊的基因与中华按蚊属同种.
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