人胆囊癌SGC996细胞株侧群细胞的分离与体外培养

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目的 分选人胆囊癌细胞株SGC996的侧群细胞,并行体外培养,初步验证其干细胞的特性.方法 应用流式细胞仪分选人胆囊癌细胞株SGC996的侧群细胞和主群细胞,将两群细胞分别在有血清和添加干细胞因子的无血清培养液条件下培养.应用噻唑蓝(MTT)法检测两群细胞在血清培养条件下的增殖能力.结果 人胆囊癌细胞株SGC996的侧群细胞分选比例仅为1.0%,在维拉帕米阻断后降至0.1%.侧群细胞在无血清培养液中能形成干细胞样“肿瘤球”,但主群细胞在该条件下生长能力较差,甚至死亡.MTT结果显示,在有血清培养条件下,侧群细胞在第5、6、7天的吸光度值分别为1.26±0.15、1.73±0.18、2.21±0.17,较主群细胞的0.95±0.06、1.31±0.10、1.86±0.11,各组差异均有统计学意义(t=3.30、3.54、3.03,P<0.05).结论 人胆囊癌细胞株SGC996中存在侧群细胞,这群细胞在体外培养能形成干细胞样“肿瘤球”,表现出更强的体外增殖能力,为胆囊癌干细胞进一步研究提供理论基础。

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