微板酶联夹心杂交法定量检测人IL—18mRNA

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lj200610819
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目的:建立一种高灵敏度、高特异性、精确、简便的微孔板酶联夹心杂交技术,定量检测人IL-18 mRNA.方法:针对人IL-18 mRNA RT-PCR产物一条链的不同区域序列设计一对特异探针,其中一条为捕获探针,5'端为氨基修饰,可以与微量DNA结合板表面的NOS基团共价结合,"竖直"地包被在微孔板内;另一条为检测探针,3'端标记生物素.提取人外周血单个核细胞中总RNA, 进行RT-PCR扩增IL-18 mRNA,产物热变性后加入已包被捕获探针的微孔板内进行杂交,再加入检
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