论文部分内容阅读
目的 研究转化生长因子(TGF)-β1对大鼠系膜细胞纤维蛋白溶酶(纤溶酶)系统的影响,并探讨反应性氧基(ROS)的作用.方法以体外培养的大鼠系膜细胞为对象,采用TGF-β1刺激12 h,部分实验中培养的细胞在刺激前应用DL-buthionine-(S,R)-sulfoximine(BSO)预处理24 h,或应用抗氧化剂N-acetylcysteine(NAC)预处理1 h.应用荧光素法测定细胞ROS含量.系膜细胞tPA、uPA和PAI-1 mRNA的表达采用RT-PCR测定.PAI-1蛋白表达应用ELISA检测.应用合成的荧光素酶底物及荧光扫描法分别测定纤溶酶、uPA、tPA活性.结果 TGF-β1可显著增加细胞ROS含量.2 ng/ml TGF-β1可显著上调PAI-1 mRNA和蛋白的表达,分别为1.9倍(P<0.01)和1.5倍(P<0.05).tPA mRNA的表达不受影响但uPA mRNA的表达较对照组下调52%(P<0.01).TGF-β1可抑制纤溶酶和uPA活性,分别为30%(P<0.01)和23%(P<0.05),但对tPA的活性无显著影响.在βSO预处理组,TGF-β1对uPA、PAI-1 mRNA表达和蛋白释放的影响得到显著增强;而NAC预处理可明显逆转由TGF-β1诱导的uPA、PAI-1 mRNA表达的上调和蛋白表达增加以及活性的改变.结论TGF-β1可促使细胞ROS产生增加.ROS介导了由TGF-β1诱导的系膜细胞PAI-1 mRNA和蛋白表达的上调以及uPA mRNA表达的下调和uPA、纤溶酶活性的下降.TGF-β1对系膜细胞纤溶酶活性的抑制主要通过抑制uPA表达和活性而实现。