猪圆环病毒2型ORF4基因编码蛋白的体外表达

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为了探讨猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF4基因结构及其所编码蛋白在PK15细胞中的表达特性,以PCV-2杭州株病毒DNA为模板进行PCR,结果扩增出了ORF4基因,并分别构建了pGEX-4T-1ORF4原核表达载体和pEGFP—C2-ORF4真核表达载体。序列分析、SDS—PAGE分析和Western—blot检测表明,PCV2ORF4基因长180bp,共编码60个氨基酸;其编码蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式存在,分子质量大小约为6.685ku。真核PK15细胞的转染试验显示,ORF4重组蛋白在PK15细
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