【摘 要】
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结构特异性核酸酶瓣状核酸内切酶1 （Flap enduclease 1，FEN1）在多种癌细胞中过度表达，被认为是癌症临床诊断的潜在生物标志物。FEN1的精确检测对于癌症早期诊断和预后具有重要意义。荧光检测法由于具有操作简单、灵敏度高等优势，被广泛应用于检测FEN1，但基于比率荧光信号检测FEN1的策略尚未见报道。本研究设计了基于DNA功能化金属有机框架材料（MOFs）的比率荧光探针(FAM-Rh
【机 构】
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天津大学理学院化学系天津市分子光电科学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（Nos.22174110，22127803，21904095）； 甘肃省高等学校产业支撑计划项目（No.2021cyzc-01）； 天津市科技重大专项与工程项目（No.19ZXYXSY00090）； 中央政府引导地方科技发展专项资金项目（No.2020-20605
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结构特异性核酸酶瓣状核酸内切酶1 （Flap enduclease 1，FEN1）在多种癌细胞中过度表达，被认为是癌症临床诊断的潜在生物标志物。FEN1的精确检测对于癌症早期诊断和预后具有重要意义。荧光检测法由于具有操作简单、灵敏度高等优势，被广泛应用于检测FEN1，但基于比率荧光信号检测FEN1的策略尚未见报道。本研究设计了基于DNA功能化金属有机框架材料（MOFs）的比率荧光探针(FAM-RhB@UiO-66-NH2)，用于细胞内FEN1的检测和成像。其中，罗丹明B（RhB）被封装在MOFs中，荧光团FAM修饰的DNA链通过Zr-O-P相互作用与MOFs结合，形成基于荧光共振能量转移（FRET）的纳米探针。在FEN1存在的情况下，DNA链被酶切割，FRET体系被破坏，荧光比率发生变化，从而可实现对FEN1的检测。在最佳实验条件下，检测FEN1的线性范围为0.01～3.0 U，线性方程为y = 0.1314x + 1.6107，检出限低至0.004 U。此探针可用于细胞内FEN1成像，能够区分癌细胞和正常细胞。
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