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为建立一种快速、简便定量测定生物样品中VB2的新型分析方法，以鸡蛋黄为样品，用分子荧光差异加标法测定。结果表明：鸡蛋黄样品中VB2的含量为402μg/100g，相对标准偏差不大于1.5%（n=6）；加标回收率为92.0%～104%；检出限为5.76×10－3μg/mL，定量限为1.92×10－2μg/mL。该法在实验条件完全相同的情况下测定，扣除了背景干扰，不需绘制工作曲线和过柱去杂质，快速、准确、简便、实用，是适合VB2测定的新型分析技术。