HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中的叶酸浓度及其药动学研究

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目的 大鼠灌胃给予叶酸溶液后,建立其在血浆中浓度的定量方法,并用于药动学研究.方法 大鼠血浆采用蛋白沉淀法进行预处理,以格列本脲为内标,采用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)检测大鼠血浆中叶酸的浓度.色谱分离采用Thermo Accucore C18色谱柱,流动相为乙腈和0.1%甲酸-水,梯度洗脱.MS采集选用ESI正离子及多反应监测模式.结果 叶酸在10~1000 ng/ml范围内线性关系良好.方法的回收率在80.0%~95.4%范围内;批内和批间的准确度为92.7%~111.4%,批内和批间精密度为2.6%~8.3%.药动学结果显示大鼠灌胃给药后叶酸在1 h左右达到最大浓度,Cmax和暴露量随剂量的增加而增大,但和剂量并不成线性相关.结论 该方法重现性好,分析时间短,能满足大鼠血浆中叶酸浓度的检测要求,并符合2015年版中国药典对生物样品分析的要求;
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