pUHD10-3-p53质粒的扩增及分离纯化

来源 :广西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xyfan
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目的:建立一种确实有效的pUHD10-3-p53质粒提取方法,为科学研究制备高纯度pUHD10-3-p53质粒奠定基础。方法:将克隆有Wt—p53基因的cDNA质粒(pUHD10-3-p53)转染感受态细菌E.coliDH5a菌株。经扩增,用小量碱裂解法提取质粒DNA,再纯化后,用紫外分光光度计测定其含量,并进行酶切电泳鉴定。结果:pUHD10-3-p53质粒用限制性内切酶BamHI酶切后在1.5%琼脂糖凝胶中电泳,可观察到3.15、1.8kb两条区带。结论:用小量碱裂解法提取pUHD10-3-p53质粒
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