人非肌肉肌球蛋白轻链激酶N端表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:panyh921
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目的:构建人非肌肉肌球蛋白轻链激酶(hnmMLCK)N端表达载体及其体外表达与表达产物的纯化。方法:用PCR方法扩增hnmMLCK的N端cDNA ,插入质粒pBKcmv中的构建成表达载体,转化入大肠杆菌XL1-blue,经IPTG诱导表达,表达产物用电洗脱的方法初步纯化。结果:经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为hnmMLCK重组质粒,SDS-PAGE证实获得分子量为21ku的融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的21%。结论:成功构建了重组hnmMLCK表达载体,并在大肠杆菌中获得表达,
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