建立经典名方桂枝芍药知母汤物质基准的HPLC指纹图谱及清除自由基活性的谱效关系,为其质量评价与经方现代化研究提供依据。采用Shimadsu GL-science C₁₈色谱柱（4.6mm×250 mm,5μm）进行检测,以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温32℃,进样量20μL。测定10批桂枝芍药知母汤物质基准样品,利用中药色谱相似度评价系统建立经典名方桂枝芍药知母汤物质基准的HPLC指纹图谱;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）法研究其清除自由基的活性,并通过pearson双变量相关分析研究谱效关系。建立了桂枝芍药知母汤物质基准指纹图谱共有模式,标定了26个共有峰,相似度在0.929～0.998。采用了对照品比对法指认了其中8个色谱峰:没食子酸、芒果苷、芍药苷、甘草苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、肉桂酸、甘草酸铵。其中14（芍药苷）,20,12（芒果苷）,13,23（肉桂酸）号共有峰含量变化与自由基清除活性呈负相关。该指纹图谱具有良好的精密度、重复性、稳定性,各共有峰分离度良好,可用于桂枝芍药知母汤的质量评价;该指纹图谱与清除自由基活性的谱效关系研究对于桂枝芍药知母汤物质基础的研究具有一定参考价值。