论文部分内容阅读
目的建立人釉原蛋白（AMG）成熟肽基因在大肠杆菌中融合表达和纯化的技术路线。方法利用已构建并经鉴定的重组质粒pGEX-4T-1／AMG转化大肠杆菌BL21，分别对诱导时间、异丙基-β—D硫代半乳糖苷（IPTG）浓度和诱导温度进行优化，在最佳诱导表达条件下，分别对菌液上清、周质、胞质和包涵体中的目的蛋白表达进行分析，在可溶性蛋白中发现大量目的蛋白，随后利用GSTrapFF亲和层析柱进行人AMG融合蛋白的过柱纯化。结果pGEX-4T-1／AMG重组质粒的双酶切凝胶电泳鉴定结果和测序鉴定结果和预期一致。最佳诱导