【摘 要】
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目的 观察金雀异黄素(genistein)对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌的血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶(MMP)-1、2、3、9的影响.方法 采
【基金项目】
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江苏省高校自然科学基础研究项目;
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目的 观察金雀异黄素(genistein)对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌的血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶(MMP)-1、2、3、9的影响.方法 采用Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂(CFA)建寺CIA大鼠模型;每周进行一次关节炎指数(AI)评分;于造模第6周摄取关节X线片,选取大鼠关节进行关节滑膜组织病理检测:取出关节滑膜组织,用胶原酶消化法分离培养原代成纤维样滑膜细胞;流式法检测滑膜细胞血管细胞黏附分子(VCAM)-1的表达;在FLS培养中加入用不同浓度的金雀异黄素(100,200.400 μmol/L),间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测FLS培养上清中VEGF及MMP-1、2、3、9的表达.结果 Ⅱ型胶原和CFA共同致敏后3 d,大鼠开始出现关节肿胀,AI逐渐增高,于第3周时最明显,观察AI评分、关节X线以及关节滑膜组织病理发现,造模组与空白对照组比较差异有统计学意义.大鼠滑膜细胞培养至第4代,检测其VCAM-1的表达高达85.5%,提示所培养的细胞即为FLS.不同浓度的金雀异黄素(100,200,400μmol/L)和甲氨蝶呤(MTX,1 mg/L)作用于FLS后,FLS培养上清中VEGF和MMP-1、2、3、9的分泌受到抑制,且抑制作用强度与药物的浓度有关.结论 本实验使用Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂成功构建了CIA大鼠模型,用胶原酶消化法成功地分离并培养了原代大鼠成纤维样滑膜细胞.一定浓度的金雀异黄素能抑制CIA大鼠FLS分泌的VEGF和MMP-1、2、3、9,且抑制作用呈浓度依赖性.
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