骨形态发生蛋白-7的过表达载体对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

来源 :临床骨科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhengrs_2009
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目的 探讨骨形态发生蛋白-7(BMP-7)的过表达载体对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法 取10例健康志愿者的骨髓组织,培养原代BMSCs。采用流式细胞仪检测BMSCs的表面蛋白,对BMSCs进行鉴定。利用基因编辑技术,构建BMP-7的过表达载体,通过慢病毒转染BMSCs,将BMSCs分成转染组和未转染组。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测BMP-7以及成骨分化标志物碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)的表达。并对两组细胞进行茜素红和ALP染色。结果 BMSCs中CD90和CD106的表达为60.2%和58.3%;CD33和CD45的表达为3.4%和2.6%。慢病毒转染BMSCs的转染滴度为3×10~8 TU/ml。RT-PCR结果:BMP-7以及成骨分化标志物ALP、Runx2和OCN的mRNA的相对表达量转染组要明显高于未转染组(P<0.05)。茜素红染色结果:转染组肉眼可见明显红色染色区域,镜下可见大量钙结节点。ALP染色结果:转染组肉眼可见紫色染色区域,镜下可见ALP染色呈强阳性。结论 慢病毒转染BMP-7可以促进BMSCs成骨分化。
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