目的:建立并验证超高效液相色谱法（UPLC）测定人血浆中阿司匹林（ASP）和水杨酸（SA）的浓度,并应用于临床ASP和SA血药浓度的测定。方法:色谱柱为ACQUITYUPLC^BEH C₁₈（2.1 mm×100 mm,1.7μm）,流动相为含0.05%三氟乙酸（TFA）的超纯水和乙腈（78%∶22%）,流速0.5 mL·min^-1,柱温30℃,进样器4℃,检测波长304 nm和277 nm,内标为替硝唑。结果:ASP和SA分别在0.4¹00μg·mL^-1和0.2⁵0μg·mL^-1线性关系良好（r²>0.999）;ASP和SA的日内、日间准确度和精密度均<15%。结论:本研究建立了一个准确、灵敏且稳定的UPLC法测定ASP和SA血药浓度的方法,可应用于临床ASP和SA血药浓度的测定和药动学研究,指导临床合理用药。