论文部分内容阅读
目的构建能同时表达HPV16,18,58三亚型E6-E7优化融合基因的重组腺病毒,为下一步获得适合国情的宫颈癌HPV三价治疗性候选疫苗打基础。方法常规扩增、构建HPV16,18,58的E6-E7融合基因,PCR定点突变滑除其转化活性后以IRES相连并重组人pAdeno-X腺病毒载体系统;体外细胞、软琼脂培养及裸鼠成瘤实验检测突变基因转化活性去除情况;重组腺病毒电击转染293包装细胞,Western blot分析外源基因表达情况。结果三型重组融合基因序列与设计完全一致,其中突变基因的转化活性显著降低,Wes