耐高温β-半乳糖苷酶的分离纯化与酶学性质分析

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为从嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)XG24发酵液中纯化到β-半乳糖苷酶,并对酶学性质进行研究,利用硫酸铵分级盐析、DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换层析和SephadexG-75分子筛凝胶过滤层析等方法进行分离纯化。结果表明:经过系列步骤纯化后,酶纯度提高了54.5倍,回收率20.4%,酶比活力达32.7U/mg。以邻-硝基酚-D-半乳糖吡喃糖苷(ONPG)为底物,研究β-半乳糖苷酶的酶学性质。最适pH6.5,最适作用温度65℃。此菌株产β-
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