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目的:获得一种新型靶向人Frizzled7(Fzd7)蛋白的人源化抗体.方法:首先用重组人Fzd7蛋白(rhFzd7)免疫BALB/c小鼠,获得鼠源抗Fzd7抗体(SHH002),并用生物膜层干涉技术(biolayer interferometry,BLI)检测SHH002的亲和力;测序获得SHH002可变区序列(V区),通过与Human Germline序列库比对选择人源化设计模板,利用Discoverystudio软件对SHH002进行人源化设计,获得人源化抗Fzd7抗体SHH002-hu,并对SHHO02-hu的纯度和亲和力进行验证,最后通过MTT实验初步验证其抗肿瘤活性.结果:杂交瘤筛选技术获得高亲和力(亲和力常数KD＜1.0×10-12 mol·L-1)鼠源抗Fzd7抗体SHH002;SHH002 V区序列比对Human Germline序列库,选择同源性最高的IGHV1/IGKV1作为人源化设计模板,保留对抗体结构稳定性起关键作用的鼠源氨基酸,将非关键的位点突变为人源氨基酸,获得人源化程度高达98％的人源化抗体SHHO02-hu;分子排阻色谱(SEC-HPLC)检测其纯度＞95％,BLI法验证其KD＜1.0×10-12 mol·L-1,MTT实验表明SHHO02-hu可有效抑制三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞的体外增殖.结论:本实验获得了高度人源化且高亲和力的靶向Fzd7抗体SHH002-hu,为多种恶性肿瘤提供一种全新的靶向治疗候选方案.