弓形虫棒状体蛋白2多克隆抗体制备纯化及其在免疫荧光定位中的运用

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zzu123456789zzuliuli
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目的制备弓形虫棒状体蛋白2(ROP2)多克隆抗体并纯化。方法将已构建的重组质粒pET32a—ROP2转化人大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)中,用0.5mmol/L异丙基-B.D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白ROP2,分离上清和包涵体,包涵体洗涤后。用尿素溶解;取纯化蛋白与等体积福氏完全佐剂或不完全佐剂混合,背部皮下免疫新西兰大白兔3次,200汕g/次,3次免疫之间分别间隔14d和19d,末次免疫10d后收集兔血清,亲和纯化柱纯化,并用问接ELISA检测抗体效价,蛋白质印迹(West
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