Cd1-型亚硝酸盐还原酶脱氮工程菌的构建与表达

来源 :中国微生态学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jdbc_jiang

【摘要】

：

目的用基因工程技术将铜绿假单胞菌PAO1中nirS基因定向克隆至表达载体pQE-30上，使nirS基因得到高效表达。方法根据GenBank公布的nirS碱基序列和表达载体pQE-30的多克隆位点设

【作者】

：

徐健张德纯

【机构】

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重庆医科大学临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆医科大学病原生物学教研室

【出处】

：

中国微生态学杂志

【发表日期】

：

2008年5期

【关键词】

：

Cd1-型亚硝酸盐还原酶脱氮微生物同步硝化反硝化基因工程 Cd1-nitrite reductase Denitrification microbacte

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目的用基因工程技术将铜绿假单胞菌PAO1中nirS基因定向克隆至表达载体pQE-30上，使nirS基因得到高效表达。方法根据GenBank公布的nirS碱基序列和表达载体pQE-30的多克隆位点设计引物，以铜绿假单胞菌PAO1的基因组DNA为模板，应用PCR技术扩增目的片段nirS；之后经过BamH I和HindⅢ双酶切，定向克隆到pQE-30上，化学转化DH5α，构建含有重组质粒的转化子pQE30-nirS-DH5α；经酶切和测序鉴定，扩增产物的碱基序列与GenBank公布的序列完全吻合，再将重组质粒p

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