泡球蚴18基因的克隆、原核表达质粒的构建及其初步表达的研究

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目的:克隆、分析泡球蚴18(Em18)抗原基因,构建pET41a-Em18原核表达质粒,并初步诱导表达Em18重组蛋白. 方法:DNAman软件设计引物,RT-PCR法克隆Em18 cDNA并构建pMD18-T/Em18质粒,测序确定序列,利用DNAman和BLAST软件,对其进行基因序列分析.构建pET41a-Em18原核表达质粒,测序鉴定插入序列正确性.IPTG初步诱导和表达rEm18-GST重组蛋白,SDS-PAGE电泳检测.结果:测序结果显示Em18抗原基因长度为486 bp,编码161个氨基酸.
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