【摘 要】
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获得特异性抗Ecp多克隆抗体,为进一步研究ecp的功能奠定基础.利用特异引物,通过RT-PCR扩增出编码Ecp蛋白的全长cDNA,克隆至谷胱甘肽S转移酶融合蛋白表达载体pGEX-4T-1(His)6C
【基金项目】
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高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划
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获得特异性抗Ecp多克隆抗体,为进一步研究ecp的功能奠定基础.利用特异引物,通过RT-PCR扩增出编码Ecp蛋白的全长cDNA,克隆至谷胱甘肽S转移酶融合蛋白表达载体pGEX-4T-1(His)6C中,转染大肠杆菌DH 5α,经诱导表达后,利用谷胱甘肽琼脂糖珠从细胞裂解物中特异吸附融合蛋白,经凝血酶裂解,释放出Ecp蛋白,再经Ni-NTA亲和层析,最终获得高纯度的Ecp蛋白.用纯化的Ecp蛋白免疫新西兰家兔,亲和层析纯化抗Ecp抗体.利用该抗体进行的Western Blot结果表明:Ecp蛋白在野生型黑
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