实时定量PCR检测流感嗜血杆菌感染实验室诊断方法的建立

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目的建立SYBR-Green染料法实时定量聚合酶链反应(PCR)检测流感嗜血杆菌(Hi)感染的实验室诊断方法。方法设计合成针对HifucK基因的引物;扩增HifucK基因,构建质粒,10倍梯度稀释后,以10~108copy/反应作为标准品绘制标准曲线,并检验新建实验室诊断方法的敏感度;采用实验室保存的肺炎支原体标准株、人型支原体标准株、阴沟肠杆菌标准株、金黄色葡萄球菌标准株、肺炎克雷伯菌标准株和大肠埃希菌标准株的DNA标本,检验新建实验室诊断方法的特异度;将新建立的实验室诊断方法,应用于临床标本的检验。结
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