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目的
观察端粒酶抑制剂(BIBR1532)对含有鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)突变肺癌细胞的影响。
方法利用慢病毒载体构建稳定表达KRAS第12外显子突变(所编码的氨基酸由甘氨酸突变为天冬氨酸，即G12D突变)的肺癌细胞株。Western blot检测G12D的表达水平。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测端粒酶活性。噻唑蓝(MTT)法、划痕实验检测端粒酶抑制剂对表达G12D的肺癌细胞增殖、药物敏感性和迁移的影响。
结果成功建立了稳定表达KRAS-G12D的CALU3和H1299细胞株；BIBR1532抑制了过表达KRAS-G12D的CALU3和H1299细胞端粒酶活性(抑制率约为50%)；BIBR1532对KRAS-G12D诱导的促肺癌细胞增殖能力、促肺癌细胞迁移能力和化疗抗性(细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性提高了10%～15%和5%～12%)都产生了明显抑制。
结论端粒酶抑制剂能够抑制KRAS-G12D突变肺癌细胞的增殖、迁移，提高KRAS-G12D突变肺癌细胞对化疗药物的敏感性。