【摘 要】
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目的选取小鼠间质干细胞C3H10T1/2进行成软骨诱导分化,探讨HIF-2a在成软骨诱导分化过程中的表达趋势。方法运用离心沉淀法,将C3H10T1/2在低氧环境下进行成软骨诱导3周。在分
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目的选取小鼠间质干细胞C3H10T1/2进行成软骨诱导分化,探讨HIF-2a在成软骨诱导分化过程中的表达趋势。方法运用离心沉淀法,将C3H10T1/2在低氧环境下进行成软骨诱导3周。在分化第3周对组织进行甲苯胺蓝染色,同时对分化组织进行Ⅱ型胶原免疫化学染色以及定量PCR检测成软骨分化相关基因的表达。结果在低氧培养条件下,实时定量PCR结果显示HIF-1a与aggrecan表达均在第2周达到峰值后降低(P<0.05),但仍较1周时表达有升高(P<0.05);关键启动基因SOX9表达逐渐升高(P<0.05);相关基因collagenⅡ,Collagen Xa1表达均在3周时均有显著升高(P<0.05);HIF-2a的表达在诱导分化过程中均受到抑制(P<0.01)。Pellet甲苯胺蓝染色将细胞外基质染呈蓝紫色,细胞核呈深蓝色。Ⅱ型胶原免疫组化染色显示,胞浆棕黄色,胞核蓝色。细胞内可见Ⅱ型胶原蛋白的表达,阳性信号主要位于细胞浆内,而细胞之间的间质内也有表达。结论 HIF-2a在C3H10T1/2成软骨诱导分化过程中表达受到抑制。
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