猪肌肉生长抑制素基因侧翼区新微卫星标记的鉴定及分析

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提取包含猪肌肉生长抑制素基因的BAC克隆,以EcoR I进行酶切并回收其中大于4kb的酶切产物,连接到pGEM-3 zf(+)载体后得到了亚克隆.测序分析表明,插入片段不属于猪肌肉生长抑制素基因的一部分,但其中包含13拷贝的(TG)n重复.以该重复序列的侧翼设计引物对猪的基因组进行分析,得到了PCR扩增产物.对一个"双肌臀"大白猪家系进行PCR扩增及非变性聚丙烯酰胺凝胶分析的结果表明,该位点以并显性方式遗传,是一个新的微卫星标记.对莱芜猪、长白猪、大白猪、杜洛克、皮特兰、民猪和二花脸7个品种的381个无关个体的检测均显示该基因座只有两个等位基因,重复数分别为13和19,是一种多态性较低的微卫星标记.与包含该基因的序列(AY208121)比对分析表明,该微卫星属于肌肉生长抑制素基因(MSTN)侧翼区的一个分子标记,在猪肉用性状QTL的精细定位和MSTN功能分析中将发挥重要作用.
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