探讨缺血预处理(IPC)对大鼠缺血再灌注(IR)肾损伤引起肾小管上皮细胞凋亡的保护作用及其与Bcl-2、Bax表达变化的关系。
方法采用夹闭小鼠双侧肾蒂30 min的方法建立小鼠IR肾损伤模型；微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂15 min的方法进行预缺血，4 d后再进行IR。实验共分为5个大组：对照组(C组)，假手术组(S组)，IR组，IPC组(IPC＋IR组)，IPC对照组(S＋IR组)；除C组外，其他4组根据再灌注的时间分亚组(再灌注后0 h，3 h，6 h，12 h，24 h，48 h，3 d，5 d，7 d)；反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测小鼠肾组织Bax、Bcl-2 mRNA表达水平；免疫组织化学方法检测小鼠肾组织Bax、Bcl-2的分布及蛋白质表达水平。原位末端转移酶标记(TUNEL)法免疫荧光染色检测肾小管上皮细胞凋亡。
结果1.与S组、S＋IR组比较，IR组IR后血肌酐、血尿素氮、肾脏病理损害评分逐渐加重，再灌注24 h达到峰值，各亚组之间差异均有统计学意义(P均<0.01)；肾组织Bax、Bcl-2 mRNA表达急剧上升，分别于6 h、24 h到达峰值，相对表达水平分别为2.66±0.12、2.70±0.10，各亚组间比较差异均有统计学意义(P均<0.01)；肾组织Bax、Bcl-2蛋白质的表达水平，各亚组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)，TUNEL免疫荧光染色C组、S组小鼠肾小管上皮未见明显的凋亡细胞；IR组在IR后肾小管上皮细胞凋亡数逐渐增多，再灌注后24 h达到峰值[(25.07±2.29)%]。2.IPC＋IR组肾脏病理损害明显减轻，Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白质表达水平、细胞凋亡明显低于IR组及S＋IR组(P均<0.05)。
结论Bax/Bcl-2与IR肾损伤密切相关，IPC可能通过调控Bax/Bcl-2参与急性肾损伤的调控。