【摘 要】
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目的将流感病毒RNA聚合酶PA6亚基片段进行亚克隆、表达,获得重组的亚克隆多肽,为进一步研究PA6亚基功能奠定基础.方法以PA亚基cDNA 为模板,用PCR方法扩增出PA6 片段,应用定向
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目的将流感病毒RNA聚合酶PA6亚基片段进行亚克隆、表达,获得重组的亚克隆多肽,为进一步研究PA6亚基功能奠定基础.方法以PA亚基cDNA 为模板,用PCR方法扩增出PA6 片段,应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pQE32重组,阳性克隆重组质粒经酶切及测序鉴定,IPTG诱导各亚克隆系高效表达,优化表达条件.结果 PCR法扩增出402bp的片段,酶切及测序鉴定获得正确的重组质粒,在E.coli M15中表达得到相对分子量约为17KD的重组蛋白,获得重组多肽.结论成功地亚克隆及表达了流感病毒RNA聚
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