【摘 要】
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为丰富传染性胰脏坏死病毒(infectious pancreas necrosis virus,IPNV)的检测方法,以GenogroupⅠ型的IPNV ChRtm213分离株基因组RNA为模板,利用一步法RT-PCR扩增获得了编码IPNV VP3基因序列(711 bp),将其克隆至pET-32a原核表达载体,利用大肠杆菌Rosetta进行VP3蛋白表达,以纯化的VP3蛋白为免疫原制备鼠抗血清,利用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对抗血清效价
【机 构】
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上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心,中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,上海海洋大学农业农村部渔业动植物病原库,中国水产科学研究院长江水产研究所
【基金项目】
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国家重点研究发展计划“蓝色粮仓科技创新”项目(2019YFD0900105),中央公益性事业单位基本科研业务费专项(2020GH05,HSY2019M),国家自然科学基金(31802345),中国博士后科学基金(2018M630893,2019T12027)。
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为丰富传染性胰脏坏死病毒(infectious pancreas necrosis virus,IPNV)的检测方法,以GenogroupⅠ型的IPNV ChRtm213分离株基因组RNA为模板,利用一步法RT-PCR扩增获得了编码IPNV VP3基因序列(711 bp),将其克隆至pET-32a原核表达载体,利用大肠杆菌Rosetta进行VP3蛋白表达,以纯化的VP3蛋白为免疫原制备鼠抗血清,利用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对抗血清效价
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