经典和高致病性PRRSV疫苗株嵌合病毒的构建及其免疫原性分析

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:trittt
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为研究经典和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)疫苗株间的生物学差异,本实验以经典PRRSV疫苗株CH-1R的全长感染性克隆pCH-1R为骨架,利用反向遗传操作技术分别将其ORF1a、ORF1b和ORF2-7替换为HP-PRRSV HuN4-F112的相应片段,构建3个全长cDNA嵌合质粒.将构建的3个重组cDNA质粒经体外转录后转染BHK-21细胞,并于Marc-145细胞中传代,拯救出3种嵌合病毒,分别命名为rCH-1R-T1a、rCH-1R-T1b和rCH-1R-T27.病毒一步生长曲线结果表明,3种嵌合病毒在Marc-145细胞中的生长特性与亲本病毒CH-1R基本一致;动物实验结果显示,嵌合病毒实验组血清中PRRSVN蛋白抗体阳转率分别为3/3 (rCH-1 R-T1a)、2/3 (rCH-1R-T1b)和1/3 (rCH-1 R-T27),而CH-1R免疫组血清N蛋白抗体检测始终为阴性.以上结果表明,HP-PRRSV HuN4-F112非结构蛋白在N蛋白抗体产生中起关键辅助或协同作用.
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