【摘 要】
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建立PCR-微孔板杂交-ELISA法检测人血清标本中巨细胞病毒DNA.将5端标记生物素的PCR扩增产物与5端标记地高辛的探针呈液相混合,90℃ 2min,55℃,1min杂交.杂交后产物被链霉亲和
【机 构】
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武汉大学医学院病毒研究所,湖北武汉,430071;武汉市铁路第一中学,湖北武汉,430033;
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建立PCR-微孔板杂交-ELISA法检测人血清标本中巨细胞病毒DNA.将5端标记生物素的PCR扩增产物与5端标记地高辛的探针呈液相混合,90℃ 2min,55℃,1min杂交.杂交后产物被链霉亲和素酶标板固定,经酶标记抗地高辛标记抗体结合显色.本试剂检测灵敏度为2.5×104 copies/mL,比传统PCR和ELISA敏度性高,特异性强,与单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型,风疹病毒、EB病毒、腺病毒核酸无交叉反应,批内CV为8.9%,批间CV为10.5%.该法可用于定性和定量检测HCMV DNA.
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