探讨人重组促红细胞生成素(rh–EPO)在早产鼠脑室周围白质损伤模型鼠脑白质中的促血管新生作用。
方法选取出生3日龄SD大鼠,随机数字表法分为假手术(Sham)组,缺氧缺血(HI)组和EPO治疗组。HI组和EPO治疗组幼鼠结扎右侧颈总动脉并吸入60 mL/L的氮氧混合气体4 h,Sham组幼鼠仅游离右侧颈总动脉。EPO治疗组术后即经腹腔给予大剂量rh–EPO(5 U/g)1次,Sham组和HI组给予等量的9 g/L盐水。采用免疫组织化学、Western blot和实时荧光定量PCR(qRT–PCR)方法检测术后48 h及96 h大鼠脑白质中微血管密度(MVD)、CD34蛋白、动静脉标志物(ephrinB2和EphB4)表达情况。
结果术后48 h,HI组CD34蛋白(0.54±0.05)较Sham组(0.42±0.05)增加(P<0.05),但HI组MVD、ephrinB2和EphB4与Sham组比较表达未见明显改变(P>0.05);EPO治疗组CD34蛋白(0.74±0.07)、ephrinB2(2.07±0.58)和EphB4(2.13±0.44)表达则较HI组(CD34蛋白:0.54±0.05,ephrinB2:0.70±0.23,EphB4:0.67±0.07)均明显增加(P均<0.05),但是MVD未见明显增多(P>0.05)。术后96 h,HI组CD34蛋白(0.85±0.06)、MVD(3.14±1.21)、ephrinB2(7.51±1.89)和EphB4(4.58±0.82)较Sham组(CD34蛋白:0.62±0.06,MVD:1.50±1.04,ephrinB2:1.28±0.24,EphB4:1.21±0.22)均明显增多(P<0.05);EPO治疗组CD34蛋白(0.98±0.07)与MVD(4.71±1.38)表达较HI组(CD34蛋白:0.85±0.06,MVD:3.14±1.21)增多(P<0.05),但ephrinB2和EphB4表达未见增多。
结论未成熟鼠脑HI损伤后出现了内源性的血管新生反应,且rh–EPO可进一步促进该反应。