【摘 要】
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目的 筛选并鉴定可与中期因子(MK)特异性结合的短肽.方法 以人重组MK蛋白为靶分子,分别从噬菌体随机7肽和环7肽展示库中筛选出与MK蛋白高特异性结合的阳性噬菌体克隆.酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定所挑选噬菌体和MK蛋白的亲和力.噻唑蓝(MTT)比色法体外评价该合成短肽对HepG2细胞生长的抑制作用.结果 经过3轮淘洗,筛选出的20个阳性克隆与MK蛋白均具有一定结合力,测序并推导出优选的3条线
【机 构】
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314000浙江,嘉兴市第一医院中心实验室,湖州市分子医学重点实验室,湖州市中心医院肝胆外科,湖州市分子医学重点实验室,湖州市分子医学重点实验室
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目的 筛选并鉴定可与中期因子(MK)特异性结合的短肽.方法 以人重组MK蛋白为靶分子,分别从噬菌体随机7肽和环7肽展示库中筛选出与MK蛋白高特异性结合的阳性噬菌体克隆.酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定所挑选噬菌体和MK蛋白的亲和力.噻唑蓝(MTT)比色法体外评价该合成短肽对HepG2细胞生长的抑制作用.结果 经过3轮淘洗,筛选出的20个阳性克隆与MK蛋白均具有一定结合力,测序并推导出优选的3条线性肽和3条环肽的氨基酸序列,合成肽能不同程度抑制HepG2细胞的增殖,其中MK-P3(CTSTAMDNC)抑制HepG2增殖作用最强(P＜0.01),其对HepG2肝癌细胞的抑制率可达40.7％.结论 成功筛选出了4条可和MK蛋白结合并对肿瘤细胞有一定抑制作用的短肽。
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