大鼠VEGF腺病毒基因转染系统的构建及鉴定

来源 :中国普通外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：king1981001

【摘要】

：

目的探讨构建携带大鼠血管内皮细胞生长因子（VEGF）的重组腺病毒载体方法，为后续的基因转染研究作准备。方法采用RT—PCR扩增的方法获取鼠源性的VEGF，并克隆入穿梭质粒pDC316。构

【作者】

：

邹君杰杨宏宇祁泓章希炜

【机构】

：

南京医科大学第一附属医院血管外科,南京医科大学公共卫生学院

【出处】

：

中国普通外科杂志

【发表日期】

：

2008年6期

【关键词】

：

血管内皮生长因子腺病毒载体基因转染 Vascular Endothelial Growth Factor （ VEGF ） Adenovirus Vec

【基金项目】

：

江苏省自然科学基金资助项目（BK2005158）.

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目的探讨构建携带大鼠血管内皮细胞生长因子（VEGF）的重组腺病毒载体方法，为后续的基因转染研究作准备。方法采用RT—PCR扩增的方法获取鼠源性的VEGF，并克隆入穿梭质粒pDC316。构建的质粒pDC316-VEGF经酶切及测序鉴定正确后，通过bpofectamine2000的介导与腺病毒包装质粒pBHGE3共转染至人胚肾细胞HEK293，经同源重组后获得携带鼠VEGF的重组腺病毒VDC316-VEGF。应用PCR鉴定重组腺病毒，空斑传代纯化病毒并反复冻融扩增病毒。以50％组织培养感染剂量法（TCID50

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