【摘 要】
：
目的 以全血为起始模板直接进行PCR多重扩增,建立一种快速、简便的Y染色体微缺失检测方法.方法 用作者自行研制的“HpH-Buffer”,以不经基因组DNA提取的抗凝全血为模板直接进
【机 构】
：
Huadong Research Institute for Medicine and Biotechnology,Nanjin,Jiangsu,210002 P.R.China华东医学生物技术研究所
论文部分内容阅读
目的 以全血为起始模板直接进行PCR多重扩增,建立一种快速、简便的Y染色体微缺失检测方法.方法 用作者自行研制的“HpH-Buffer”,以不经基因组DNA提取的抗凝全血为模板直接进行多重PCR扩增.分别在5管中检测无精症因子(azoospermia factor,AZF)区域的a区、b区和c区共12个序列标签位点(sequence tagged sites,SIS).为保证方法有效性,加做Y染色体性别决定区(sex-determining region Y,SRY)和X/Y连锁锌指蛋白基因(X-linked or Y-linked zinc finger gene,ZFX/Y)作为内控.同时,为考察方法的准确性,对每例血液样本提取基因组DNA平行实验.结果 共检测了156例男性血液样本,每组实验均加做阳性对照(正常已生育男性样本)和阴性对照(正常女性样本),以保证实验有效性.结果表明,156例样本中有144例无缺失,AZFa区缺失1例,AZFb区缺失1例,AZFc区缺失7例,AZFb和AZFc区缺失1例,AZFa、AZFb和AZFc区全缺失2例.以全血为模板和以基因组DNA为模板进行扩增所得到的实验结果完全一致.结论 所建立的方法省略了DNA提取这一繁琐的步骤,减少了PCR实验过程中可能出现的污染,缩短了操作时间,节约了实验成本.可在2小时内完成所有检测过程,有效地提高了临床检测效率.“HpH-Buffer”的试剂成本很低,全部检测成本与普通PER扩增基本相同.
其他文献
目的 分析探讨抗核抗体(ANA)筛查试验与特异性抗体确认试验的相关性.方法 用间接免疫荧光法(IIF)作为ANA筛查试验,用免疫印迹法(LIA)作为抗核抗体谱(ANAs)特异性抗体确认试验,对500份临床就诊患者血清标本进行检测分析,并根据IIF-ANA和LIA-ANAs检测结果分为4组(IIF-ANA~+/LIA-ANAs~+组、IIF-ANA~+/LiA-ANAs~-组、IIF-ANA~-/L
绝经后阴道出血因其是子宫内膜癌的主要症状之一,已引起临床医生的高度重视.作者对2001年1月至2002年12月间205例绝经后阴道出血病例进行临床和病理分析.报告如下。
目的 通过比较髓系细胞触发受体-1(TREM-1)mRNA在活动期和缓解期溃疡性结肠炎(UC)患者以及健康体检者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平,探讨TREM-1与UC疾病活动性的关系.方法 依据结肠镜检和病理活检结果,将UC患者分为活动期和缓解期2组,采用实时荧光定量逆转录(FQ-RT)-PCR检测70例UC患者(活动期患者38例,缓解期患者32例)和20名健康体检者PBMC中TREM-
结节性甲状腺肿是一种常见的甲状腺疾病,目前对其诊断及治疗争议较多,且临床上存在较高的误诊率.1993年1月至1996年12月共收治结节性甲状腺肿139例,均经手术病理证实.现分析如下。
自1999～2003年利用腓肠神经营养血管为轴心血管,制成岛状筋膜瓣,并于筋膜瓣表面Ⅰ期游离植皮治疗小腿部皮肤缺损9例,取得满意效果.报告如下。
目的 探讨中国汉族人群中hMLH1和hMSH3基因多态性及其组成的单倍型与乳头状甲状腺癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)遗传易感性的关系.方法 采用以医院为基础的1:1配对病
目的 研究2,3,7,8-四氯二苯二噁英(2,3,7,8-tetrachlrodibenzo-p-dioxin,TCDD)诱导的胎鼠腭发育过程中转化生长因子β3(transforming growth factor beta 3,TGF-β3)、DNA甲
作者自1998年12月以来,在常规抗心衰治疗的基础上加用卡托普利与螺内酯治疗慢性充血性心力衰竭,临床疗效满意.现报告如下。
临床使用的抗癌药物大多有恶心、呕吐等不良反应.文献报道恩丹西酮对预防化疗所致的恶心、呕吐有一定的疗效[1].为观察其止吐作用,作者对1999年8月至2002年8月收治的42例联合化疗病人,分别以恩丹西酮联合胃复安、地塞米松方案和胃复安+地塞米松方案来预防化疗所致呕吐,观察其疗效及不良反应.现将结果报告如下。