【摘 要】
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目的 探讨冬凌草甲素抑制结肠癌细胞HT.29的作用及其机制.方法 浓度为1～50 μmol/L的冬凌草甲素分别作用结肠癌细胞或转染小干扰RNA (siRNA)的结肠癌细胞,噻唑蓝(MTT)法观察冬
【机 构】
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450003,郑州大学人民医院(河南省人民医院)重症医学部南京医科大学附属无锡市人民医院肿瘤科,无锡,214023;江苏大学附属昆山市第一人民医院肿瘤科,昆山,215300;
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目的 探讨冬凌草甲素抑制结肠癌细胞HT.29的作用及其机制.方法 浓度为1～50 μmol/L的冬凌草甲素分别作用结肠癌细胞或转染小干扰RNA (siRNA)的结肠癌细胞,噻唑蓝(MTT)法观察冬凌草甲素对结肠癌细胞活力的影响,Western blot检测冬凌草甲素作用的HT.29细胞中腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)、磷酸化AMPKα (p-AMPKα)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、磷酸化ACC(p-ACC)、磷酸化p53(p-p53)、磷酸化S6K(p-S6K)及磷酸化S6(p-S6)的表达.结果 冬凌草甲素具有抑制结肠癌细胞活力的作用,其抑制作用呈时间剂量曲线,50 μmol/L的冬凌草甲素作用HT.29细胞72 h后的细胞活力最低,为21.6％.随着作用时间和剂量的增加,HT-29细胞p-AMPKα、p-ACC和p-p53蛋白表达逐渐增加,p-S6K及p-S6的蛋白表达减弱.转染AMPKαsiRNA的结肠癌细胞活力为(73.3±2.8)％,明显高于转染错义siRNA组的细胞活力[(19.5±1.2)％],两组间差异有统计学意义(P＜0.05),p-AMPKα、p-ACC、AMPKα和p-p53蛋白表达强于转染错义siRNA组,而p-S6的蛋白表达弱于转染错义siRNA组.结论 冬凌草甲素通过AMPKα活化通路抑制HT-29细胞活力.冬凌草甲素抑制结肠癌细胞活力与p-AMPKα、p-p53蛋白激活及p-S6K与p-S6的蛋白抑制相关,p53、S6可能是冬凌草甲素抑制结肠癌细胞p-AMPKα活化通路的下游蛋白.
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