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目的:建立了中空纤维液相微萃取-高效液相色谱联用（HP-LPME-HPLC）的方法,用于分析检测牛奶中痕量的雌二醇的含量。方法:采用自制的中空纤维萃取装置,考察并优化了影响HP-LPME的因素,仅用100μl正辛醇作为萃取溶剂,在600 rpm搅拌速度下萃取1 h,雌二醇的富集倍数可达200倍。结果:雌二醇在1.00 ng.m l-1~125 ng.m l-1范围内线性关系良好（R=0.9985）,最低检出限0.571 ng.m l-1,平均回收率分别为96.4%、98.7%、98.1%。结论:该方法样品前处理简单、成本低,且灵敏度高、环境友好,适用于痕量雌二醇的分析检测。