【摘 要】
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黑曲霉是一种重要的发酵工业微生物,也是用于研究丝状真菌生长、发育、代谢、基因功能等的模式微生物。将构巢曲霉来源的乙酰胺酶编码基因amdS在黑曲霉中异源表达,成功得到黑
【机 构】
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天津科技大学生物工程学院,天津实发中科百奥工业生物技术有限公司
【基金项目】
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天津科技大学青年教师创新基金项目(2016LG12),国家自然科学基金项目(21706192),天津市特聘教授2015计划项目,工业微生物优良菌种选育与发酵技术公共服务平台项目(17PTGCCX00190)
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黑曲霉是一种重要的发酵工业微生物,也是用于研究丝状真菌生长、发育、代谢、基因功能等的模式微生物。将构巢曲霉来源的乙酰胺酶编码基因amdS在黑曲霉中异源表达,成功得到黑曲霉amdS转化子。经表型分析,amdS赋予了黑曲霉在乙酰胺为唯一氮源的培养基上生长的能力,而野生型菌株则生长微弱。构建了以amdS为筛选标记的基因敲除载体,以草酰乙酸水解酶基因oahA上下游同源序列构建oahA敲除质粒,转化黑曲霉后成功筛选到oahA敲除菌株,草酸合成水平明显降低。结果表明,利用amdS作为营养筛选标记能够很好地应用于黑曲霉
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