Notch信号影响前列腺癌细胞DU145恶性生物学行为的机制研究

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 1次 | 上传用户:fstjqx
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目的 研究下调受体相互作用蛋白激酶4(RIPK4)调控Notch信号对前列腺癌细胞DU145恶性生物学行为的影响。方法 用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法和蛋白质印迹(Western blot)法检测正常前列腺上皮细胞RWPE-1和前列腺癌细胞LNCap、DU145、22RV1中RIPK4 mRNA和蛋白表达水平。前列腺癌细胞DU145分成control、sh-NC(转染shRNA control)、sh-RIPK4(转染RIPK4 shRNA)、sh-RIPK4+Jagged1组(转染RIPK4 shRNA,Notch信号激活剂Jagged1处理)。以细胞计数法-8(CCK-8)检测细胞增殖,以流式细胞术检测细胞凋亡情况,以Transwell小室检测细胞迁移情况,以蛋白质印迹(Western blot)法检测Notch1、Hes1蛋白表达。结果 正常前列腺上皮细胞RWPE-1和前列腺癌细胞LNCap、DU145、22RV1中RIPK4 mRNA水平为1.00±0.08,1.68±0.10,1.94±0.07和1.77±0.13;RIPK4蛋白水平分别为0.19±0.03,0.33±0.03,0.43±0.03和0.36±0.02。前列腺癌细胞LNCap、DU145、22RV1中RIPK4 mRNA和蛋白表达水平均高于正常前列腺上皮细胞RWPE-1(P<0.05);前列腺癌细胞DU145中RIPK4 mRNA和蛋白表达水平高于前列腺癌细胞LNCap、22RV1(P<0.05)。Control、sh-NC、sh-RIPK4和sh-RIPK4+Jagged1组前列腺癌细胞DU145增殖活性(OD值)分别为0.55±0.04,0.56±0.04,0.42±0.04和0.50±0.03;凋亡率分别为(4.15±0.28)%,(4.28±0.37)%,(8.23±0.67)%和(5.99±0.45)%;迁移数目分别为(96.99±13.44),(93.45±14.50),(72.36±4.43)和(86.73±8.01)个。与Control、sh-NC组比较,sh-RIPK4组前列腺癌细胞DU145中Notch1、Hes1蛋白水平、增殖活性、迁移数目均降低,细胞凋亡率升高(均P<0.05);与sh-RIPK4组比较,sh-RIPK4+Jagged1组前列腺癌细胞DU145中Notch1、Hes1蛋白水平、增殖活性和迁移数目均升高,凋亡率降低(均P<0.05)。结论 下调RIPK4通过抑制Notch信号改善前列腺癌细胞DU145恶性生物学行为。
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