初步观察PVAX1-HPV58m E6E7FcGB复合DNA疫苗的抗肿瘤免疫效果。方法在检测该复合疫苗的免疫效果前,自行构建了稳定表达HPV58E6E7融合基因的B16-HPV58E6E7成瘤细胞系,表达并纯化了HPV58E6E7-GST融合蛋白作为抗原。将该疫苗免疫C57BL/6小鼠 (免疫组) 后,通过抗肿瘤移植保护实验和肿瘤生长抑制实验观察该疫苗对小鼠负荷的B16-HPV58E6E7移植瘤的防治效果;通过特异性抗体检测、酶联免疫斑点检测、特异性杀伤实验观察该疫苗在被免疫小鼠体内诱发的体液和细胞免疫反应。以单纯抗原PVAX1-HPV58m E6E7Fc免疫小鼠作为单纯抗原组。
结果抗肿瘤移植保护实验显示,经PVAX1-HPV58mE6E7FcGB疫苗免疫的小鼠成瘤率仅为9/15,但成瘤时间最长[为 (13.6±1.7) d],且肿瘤生长最慢。在肿瘤生长抑制实验中,疫苗组小鼠的肿瘤生长抑制率达81.4%。体液免疫检测显示,该疫苗和单纯抗原均能在小鼠体内诱发特异性抗体,最高滴度分别为1∶25 600和1∶12 800,两组比较,差异无统计学意义 (P>0.05) ;但在细胞免疫检测中,疫苗组激活的特异性T淋巴细胞数[ (219±34) 个/4×105个脾淋巴细胞]约为单纯抗原组[ (55±25) 个/4×105个脾淋巴细胞]的4倍,两组比较,差异有统计学意义 (P<0.05) ;且该疫苗诱发的特异性针对B16-HPV58E6E7细胞的杀伤率 (最高为43.3%) 也明显高于单纯抗原组 (杀伤率最高为31.3%),两组比较,差异有统计学意义 (P<0.05) 。
结论PVAX1-HPV58m E6E7FcGB复合DNA疫苗能有效激发特异性的体液和细胞免疫反应,显著抑制B16-HPV58E6E7肿瘤细胞的生长,在细胞免疫上优于单纯抗原,可作为HPV58阳性相关肿瘤及其癌前病变免疫治疗的候选疫苗。