【摘 要】
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目的 建立重组人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)等电点(isoele-ctric point,pI)全柱成像毛细管等电聚焦电泳(whole column imaging detection-capillary isoelectric focusing,WCID-CIEF)测定方法,并进行验证.方法 采用WCID-CIEF测定重组人EV71 VLPs的pI,对WCID-CIEF的聚焦时间和尿素浓度进行优化,并对方法的专属
【机 构】
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上海至成生物科技有限公司,上海200051;上海生物制品研究所有限责任公司,上海200051;上海至成生物科技有限公司,上海200051;上海生物制品研究所有限责任公司,上海200051
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目的 建立重组人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)等电点(isoele-ctric point,pI)全柱成像毛细管等电聚焦电泳(whole column imaging detection-capillary isoelectric focusing,WCID-CIEF)测定方法,并进行验证.方法 采用WCID-CIEF测定重组人EV71 VLPs的pI,对WCID-CIEF的聚焦时间和尿素浓度进行优化,并对方法的专属性、准确度、重复性和中间精密度进行验证.结果 选择3000 V聚焦5 min作为WCID-CIEF的聚焦条件,样品处理时不添加尿素.空白缓冲液对重组人EV71 VLPs pI的测定无干扰;WCID-CIEF分别重复测定pI marker 5.85和pI marker 7.05样品6次的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为0.18％和0.06％;重复测定6次重组人EV71 VLPs pI的RSD为0.08％;不同实验人员在不同日期重复测定12次重组人EV71 VLPs pI的RSD为0.14％.结论 WCID-CIEF测定重组人EV71 VLPs pI的专属性、准确度、重复性和中间精密度均良好,该方法快速、准确,可用于重组人EV71 VLPs的质量评价.
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目的 考察肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)灭活疫苗于(40±2)℃条件下放置的稳定性,为该疫苗储存和运输过程中冷链破坏时(高温),疫苗有效期内的有效性和安全性提供参考.方法 将3批(P1、P2、P3)出厂检验合格、按储存要求2～8℃储存至有效期2年的EV71灭活疫苗分别于(40±2)℃放置0、24、48、72、96 h后,检测其抗原含量,了解高温条件下疫苗的稳定性.再选取另3批(P4、P5、P6)储存条件一致的EV71灭活疫苗,于(40±2)℃放置24h后,按照企业注册标
目的 在保证分离效果、多糖回收率的前提下,优化层析法纯化C群脑膜炎球菌多糖的工艺条件,以提高层析介质柱容量,同时降低脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,SDC)使用量.方法 将C群粗糖样品溶于1％ SDC的Tris-HC1缓冲液中进行预处理,用串联的装填Capto Adhere和Capto DEAE介质的层析柱,将多糖分离纯化,超滤脱盐后获得多糖原液.考察缓冲液中SDC含量、上样粗糖浓度、上样量对层析分离效果的影响,优化获得最佳工艺条件;在最佳工艺条件下,考察层析柱的使用寿命以利于层析介质
澄江组是晋宁不整合面之上最早沉积的地层之一,了解其物源对于认识扬子西缘早期地壳演化具有重要意义.对扬子西缘东川地区澄江组底部碎屑锆石进行了U-Pb定年和Lu-Hf同位素分析.结果显示,澄江组碎屑锆石的年龄谱具有780～900 Ma、约1000 Ma、约1800 Ma的峰值,最年轻一组碎屑锆石年龄加权平均值为801±5 Ma(MSWD=2.4,n=9),与区内澄江组底部火山岩的年龄十分接近,限定研究区澄江组的沉积下限为约800 Ma.综合碎屑锆石U-Pb年龄和Hf同位素组成、锆石形态及古地理特征,认为东川地
目的 探讨水溶性辅酶Q10(coenzyme Q10,CoQ10)对鱼藤酮诱导帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠疾病的延缓作用及其机制.方法 将Wistar大鼠随机分为5组:CoQ10对照组、葵花油对照组(溶媒对照)、鱼藤酮造模组(PD)、CoQ10预治疗+PD组(CoQ10B)和PD+ CoQ10后治疗组(CoQ10A),每组10只.通过旷场试验、神经运动功能试验、组织病理学观察及氧化应力关联基因和氨基酸脱羧酶基因表达水平评价水溶性CoQ10对鱼藤酮诱导PD模型大鼠疾病的恢复作
目的 鉴定茶树中的Ⅲ类过氧化物酶(classⅢperoxidases,POD)基因家族成员,并分析其表达模式.方法 利用生物信息学方法鉴定茶树基因组中的POD基因家族成员,并检测其染色体定位、基因结构、蛋白质保守基序、进化关系及共线性关系;同时分析其在茶树不同组织中及经干旱胁迫、盐胁迫和冷胁迫后茶树中的转录组数据.结果 鉴定出茶树基因组中共有122个POD基因.122个茶树POD基因在茶树染色体上分布不均,并有较多串联基因重复序列;相同亚家族的基因结构和保守基序基本一致;根据进化关系茶树POD基因可分为5
扬子陆块西缘黎溪—菜子园—通安地区前寒武纪地质体分布广泛,是探讨扬子陆块前寒武纪地质演化的重要载体.对会理黎溪地区变辉长岩开展岩石学、全岩地球化学及锆石U-Pb定年研究.结果显示,黎溪变辉长岩形成于1508±21 Ma;在岩石地球化学组成上,它们属于亚碱性拉斑岩石系列,总体上略微富集轻稀土元素,高场强元素Nb、Ta、Zr、Hf等无明显亏损,大离子亲石元素Ba、Sr等不同程度富集.通过岩石成因分析认为,岩浆在上升过程中经历了一定程度的分离结晶作用,但并未受到明显的地壳混染,母岩浆可能来自软流圈地幔.地球化学
目的 对人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)组织配型基因分型国家参考品进行协作标定.方法 选择具有良好资质的4家实验室按统一的协作标定方案进行实验.采用PCR-SSO法、PCR-SBT测序法、NGS测序法对38支HLA组织配型基因分型国家参考品样本进行协作标定,NGS测序法及PCR-SBT测序法每个样本测定1次,PCR-SSO法每个样本测定3次.同时采用PCR-SBT测序法检测国际HLA质控盘(51份样本),进行实验的质量控制.结果 4家协作单位对38支HLA组织配型基
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