N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶基因的克隆与表达

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按本室纯化的N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶(DCase)的N-末端氨基酸序列设计了正向引物,并在已报道的不同来源菌株DCase的氨基酸序列同源性分析的基础上,设计了反向引物.用菌株No.2262总DNA为模板,经PCR扩增获得长度为约0.9kpb的片段,DNA序列分析表明基因全长为912bp.将该片段插入pET-3a,构建成重组子pET-DCase,并在E.coli DH5α中获得表达,经SDS-PAGE检测,表达产物分子量与天然纯DCase相同,约为35kD.
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