【摘 要】
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目的表达含有人OX40胞外段的融合蛋白，纯化目的蛋白，为下一步制备抗人OX40单克隆抗体及鉴定打下良好的基础。方法采用冰冷热击法将测序正确的pET32a—OX40胞外段的重组质粒转入
【机 构】
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潍坊医学院免疫学教研室、山东省高校免疫学重点实验室
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目的表达含有人OX40胞外段的融合蛋白，纯化目的蛋白，为下一步制备抗人OX40单克隆抗体及鉴定打下良好的基础。方法采用冰冷热击法将测序正确的pET32a—OX40胞外段的重组质粒转入表达菌株BL21（DE3）的感受态细胞，接种于含氨苄青霉素的培养基筛选出阳性克隆。将阳性克隆细菌用IPTG诱导培养，收集不同时间的培养产物，离心分离菌体，取菌体超声破菌，离心收集胞质上清和包涵体沉淀，进行SDS．PAGE分析，观察不同时间条件对目的蛋白表达的影响及目的蛋白分布情况，筛选优化表达条件。采用Ni离子亲合层析柱纯化目
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