一种利用CRISPR/Cas9对细胞添加生物条形码的新方法

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旨在利用CRISPR/Cas9对细胞添加不同的生物条形码(Barcode),实现对细胞进行不同的标记。将生物条形码序列、条件诱导性Cas9序列及相应的sg RNA序列通过PB酶整合到细胞中,诱导Cas9表达之后对生物条形码序列测序分析细胞的标记情况。所设计的生物条形码含有6个相互重叠的sg RNA识别位点,这种设计可以使条形码序列只会被Cas9切割一次。结果显示,所设计的生物条形码序列在N2a细胞中经Dox诱导之后能够高效地被Cas9切割,所挑的9个克隆中,生物条形码序列有9种不同的基因型。含有受loxp
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