探讨炎症微环境作用下经典Wnt/β-联蛋白（β-catenin ）与非经典Wnt/Ca2+通路的平衡对牙周膜干细胞（periodontal ligament stem cells，PDLSC）成骨分化的调控作用。
方法收集解放军总医院口腔科2015年3至6月因治疗需要拔除的前磨牙和第三磨牙8颗及慢性牙周炎牙齿8颗，培养慢性炎症组织来源的PDLSC （PDLSC from patients diagnosed as periodontitis ，P-PDLSC）与正常组织来源的PDLSC （PDLSC obtained from a healthy microenvironment，H-PDLSC）。RNA干扰转染β-联蛋白至H/P-PDLSC，观察细胞状态并用蛋白质印迹法检测转染效果。实时定量PCR技术检测转染后Runt相关转录因子2 （Runt-related transcription factor 2，Runx2）、β-联蛋白及Nemo样激酶（nemo like kinase，NLK) mRNA表达。成骨诱导3 d后蛋白质印迹法检测Ca2+/钙调素依赖型蛋白激酶Ⅱ（Ca2+/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ，CaMKⅡ）和NLK的表达，免疫荧光检测CaMKⅡ的表达。
结果蛋白质印迹法检测RNA干扰24 h抑制H/P-PDLSC siRNA β-联蛋白转染组中β-联蛋白的表达。成骨诱导3 d后实时定量PCR结果显示，P-PDLSC siRNA β-联蛋白组Runx2 (4.553±0.659）显著高于P-PDLSC空质粒转染组（1.918±0.315）（P=0.000），NLK mRNA表达（7.341 ± 1.331）亦显著高于空质粒转染组（5.664±0.792）（P=0.030）；与之相应的是蛋白质印迹法检测P-PDLSC siRNA β-联蛋白组与P-PDLSC空质粒转染组相比CaMKⅡ、NLK蛋白表达水平上升。免疫荧光检测结果显示，成骨诱导后H-PDLSC及P-PDLSC siRNA β-联蛋白组CaMKⅡ表达增强且高于H/P-PDLSC空质粒转染组。
结论炎症微环境作用下经典／非经典Wnt通路在PDLSC成骨分化过程中均发挥重要作用，抑制β-联蛋白可增强非经典Wnt/Ca2+通路，促进干细胞的成骨分化。