【摘 要】
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目的:建立可定量检测质粒DNA超螺旋构象相对百分含量的毛细管凝胶电泳法(CGE),并开展方法学验证研究及初步应用探讨。方法:选用涂层毛细管,采用荧光检测器CGE法分离质粒DNA,首先通过限制性内切酶和缺刻酶处理法确认质粒DNA超螺旋(covalently closed circular,ccc)、线性(linear)及开环(open circular,oc)这3种构象在电泳图谱中的位置,然后通过对荧光染料、样品上样浓度等条件进行优化,建立质粒DNA构象的检测方法。对所建方法进行专属性、准确性、线性、精密度
【机 构】
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中国食品药品检定研究院,广州威溶特医药科技有限公司,上海爱博才思分析仪器贸易有限公司
【基金项目】
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国家药典委员会2020年药典标准提高课题(1041740404401)。
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目的:建立可定量检测质粒DNA超螺旋构象相对百分含量的毛细管凝胶电泳法(CGE),并开展方法学验证研究及初步应用探讨。方法:选用涂层毛细管,采用荧光检测器CGE法分离质粒DNA,首先通过限制性内切酶和缺刻酶处理法确认质粒DNA超螺旋(covalently closed circular,ccc)、线性(linear)及开环(open circular,oc)这3种构象在电泳图谱中的位置,然后通过对荧光染料、样品上样浓度等条件进行优化,建立质粒DNA构象的检测方法。对所建方法进行专属性、准确性、线性、精密度
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