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目的
探讨同型半胱氨酸诱导小胶质细胞表达白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的机制。
方法将体外培养的小鼠小胶质瘤细胞(BV-2细胞)分成空白对照组、半胱氨酸(Cys)组、同型半胱氨酸(Hcy)组和同型半胱氨酸+还原型谷胱甘肽(Hcy+GSH)组,培养72 h。应用反转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)方法检测IL-1β和TNF-α mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中细胞因子的蛋白浓度,蛋白质印迹法(Western blot)检测NF-κB/p65的含量。
结果空白对照组、Cys组、Hcy组和Hcy+GSH组细胞内IL-1β和TNF-α mRNA(F=48.63、130.76,均P<0.05)和蛋白表达(F=702.91、293.69,均P<0.05)以及NF-κB/p65含量(F=212.06, P<0.05)差异均有统计学意义;与空白对照组比较,Hcy组细胞内IL-1β和TNF-α mRNA和蛋白表达明显增加,Hcy+GSH组较Hcy组表达水平下降,Hcy组NF-κB/p65含量高于其他组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。
结论Hcy可诱导小胶质细胞表达IL-1β和TNF-α,NF-κB信号通路可能参与了此过程。