小鼠睫状神经营养因子基因的克隆及真核表达载体的构建

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目的:分别构建野生型和截短型小鼠睫状神经营养因子(CNTF)基因的真核表达载体。方法:通过逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)扩增小鼠CNTF野生型全长编码序列,体外定点突变获取截短型CNTF的互补DNA(cDNA)编码序列.将上述两序列分别克隆至pGEM—T Easy载体,经限制性内切酶EcoRI和XbaI双酶切后,将野生型和截短型CNTF基因连入pTracer—CMV真核表达载体,DNA测序鉴定。结果:PCR成功扩增了野生型和截短型CNTF基因,DNA序列分析证实两种真核表达载体中的CNTF序列与Gen
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