【摘 要】
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为建立能同时检测牛诺如病毒(Bovine Norovirus,BNoV)和牛嵴病毒(Bovine kobuvirus,BKoV)的聚合酶链式反应方法,根据BNoV和BKoV基因组的保守区域设计2对特异性引物,预期特异
【机 构】
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河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南牧业经济学院制药工程学院,河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室
【基金项目】
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国家现代农业肉牛牦牛产业技术体系(CARS-37);河南省农业科学院自主创新专项基金(2017ZC51,2018ZC56);河南省“四优四化”科技支撑行动计划(2017-106-2130106)
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为建立能同时检测牛诺如病毒(Bovine Norovirus,BNoV)和牛嵴病毒(Bovine kobuvirus,BKoV)的聚合酶链式反应方法,根据BNoV和BKoV基因组的保守区域设计2对特异性引物,预期特异性扩增的片段大小分别为542 bp和216 bp,建立了BNoV和BKoV的双重PCR检测方法。该方法能特异性扩增BNoV和BKoV的目的条带,且未扩增出其他犊牛腹泻病毒性病原;BNoV和BKoV的最低检测限分别为5.39×10~5 copies/μL和2.23×10~6 copies/μL。对临床采集的127份犊牛腹泻样品检测结果显示,BNoV的阳性率为6.30%(8/127),BKoV的阳性率为4.72%(6/127),两者与单一PCR检测结果相一致。本研究建立的双重PCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性,可用于BNoV和BKoV的快速检测和流行病学调查。
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