Th1/Th2相关细胞因子基因检测方法的建立

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建立检测Th1/Th2相关细胞因子的方法。方法:设计6对用于IL-2、IL-4、IL-10、IL-13、IFNr和β-actin基因扩增的引物,建立可用于Th1/Th2相关细胞因子检测的RT-PCR技术,同时用切口平移法制备6种细胞因子的cDNA探针,建立RNA斑点杂交技术。结果:用RT-PCR和RNA斑点杂交技术检测20种肿瘤细胞株,发现11/20为Th2型细胞因子表达,8/20为Th0型,1/20未检测到细胞因子。结论:RT-PCR技术和RNA斑点杂交技术是检测Th1/Th2相关细胞因子的有效方法。 Establish methods to detect Th1/Th2 related cytokines. METHODS: Six pairs of primers for the amplification of IL-2, IL-4, IL-10, IL-13, IFNr, and β-actin genes were designed, and RT-PCR techniques for the detection of Th1/Th2 related cytokines were established. Simultaneously, six kinds of cytokines cDNA probes were prepared by nick translation method, and RNA dot blot hybridization technology was established. RESULTS: Twenty tumor cell lines were detected by RT-PCR and RNA dot blot hybridization. 11/20 were found to be Th2-type cytokines, 8/20 were Th0-type, and 1/20 did not detect cytokines. Conclusion: RT-PCR and RNA dot blotting are effective methods for detecting Th1/Th2 related cytokines.
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